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上海信帆生物供應(yīng)真菌RNA提取試劑盒

更新時間:2020-06-08      瀏覽次數(shù):1771

上海信帆生物供應(yīng)真菌RNA提取試劑盒,產(chǎn)品有大量現(xiàn)貨,除此之外我們還備有血液RNA提取試劑盒,病毒RNA提取試劑盒等等,歡迎大家咨詢!

 

真菌RNA快速提取試劑盒適用于各種形態(tài)和各個種屬的真菌及革蘭氏陽性細菌,包括 Candida albican、Saccharomyces cerevisiae、 Schizosaccharomycespombe、Pichiapastoris、Bacillus subtilis、Staphylococcusaureus 等。

 

(一)菌體裂解:

 

1.將 50 mg 的干菌絲(或 100 mg的鮮菌絲、或適當數(shù)量的真菌菌落)轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 離心管中。對于液體真菌培養(yǎng)物,在1.5mL離心管中多次離心收集1-10 mL 的菌體沉淀。

 

2.在菌體沉淀中加入 0.4 mL 裂解液I震蕩混勻。

 

注:如果裂解液I存放時產(chǎn)生沉淀,請置于 65℃融化后使用。

 

3.加入 0.4 mL裂解液II,劇烈震蕩 30 s后65℃水浴 5 min。

 

4.12,000-15,000 rpm 離心3 min ,轉(zhuǎn)移上清到1.5 mL離心管中。

 

5.在上清中加入0.1 mL 的裂解液II和0.1mL氯方(自備)震蕩 30 s混勻。 

 

6.  12,000-15,000 rpm 離心3 min ,轉(zhuǎn)移上清到5 mL 離心管中。

 

(二)RNA收集:

 

1.  在步驟(一)所得的上清中加入3倍體積(約1.5 mL )的結(jié)合液III和1倍體積(約0.5 mL)的結(jié)合液IV,顛倒數(shù)次混勻后,分多次上RNA吸附柱,每次上柱后均先室溫放置 2 min,然后 12,000 rpm 離心 1 min,倒掉穿透液。

 

2.  在吸附柱中加入500 μL洗滌液,12,000 rpm離心1 min,棄穿透液。

 

3.  再將吸附柱12,000 rpm離心30 s以甩干乙醇。

 

4.  將吸附柱放入一個干凈的1.5 mL離心管中。在吸附柱中央加入50 μL洗脫液,室溫靜置2 min。

 

5.  12,000 rpm離心2 min。離心管中溶液即為 RNA 樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。

 

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 上海信帆生物供應(yīng)真菌RNA提取試劑盒

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